BID-seq绘制首篇PH肺组织Ψ单碱基图谱：全局Ψ修饰失调

为了回答“PH中Ψ修饰是否失调”这一核心问题，研究团队对5例第3组PH患者和5例对照供体肺组织进行了BID-seq。BID-seq是一种能够在单碱基分辨率上检测Ψ修饰的新技术，相比传统方法具有更高的精度和定量能力，这也是该研究能够绘制首篇PH肺组织Ψ图谱的前提。转录组分析显示，PH患者存在大量Ψ修饰mRNA（Fig.1A）。修饰位点侧翼序列富集GCTA和GCAT基序（Fig.1B），高频修饰出现在UGΨGU、AGΨGG、UGΨGG和GGΨGG等基序中（Fig.1C）。Ψ修饰概率图显示，对照组许多位点集中于Ψ ratio为0，而PH组在0–0.25区间分布频率更高，提示PH中Ψ水平整体升高（Fig.1D）。这一结果说明，Ψ修饰并非个别基因的偶然变化，而是全局性失调。此外，60.8%的修饰位于编码区（CDS；Fig.1E），提示这些修饰可能直接影响mRNA的稳定性和翻译效率。

KEGG和GO富集分析显示，这些基因富集于细胞外基质-受体相互作用、细胞黏附分子、PI3K-AKT信号和血管生成等通路（Fig.1F、1G）；GSEA进一步显示TGF-β响应和细胞外基质组织通路显著富集（Fig.1H）。这些通路恰好是肺血管重塑的核心环节，提示Ψ修饰失调可能通过调控这些通路参与PH致病。随后，研究检测功能明确的PUSs，qPCR证实PUS7在第3组PH患者肺组织中显著上调，且上调幅度高于其他PUSs（Fig.1I–1M）。从讨论角度看，PUS7的上调可能不是伴随现象，而是驱动Ψ修饰失调的关键酶。这为后续功能验证提供了明确方向。

图1. PH肺组织中的Ψ修饰

a. 亚硫酸氢盐诱导缺失测序（BID-seq）显示第3组肺高压（PH）患者（n=5）肺组织mRNA中假尿苷（Ψ）修饰水平。
b. PH组中Ψ修饰mRNA的基序分布特征。
c. 散点图展示供体和PH患者中Ψ修饰基序的频率。
d. Ψ修饰概率图。x轴为Ψ ratio，y轴为概率密度；概率密度越高表明该比值在相应组中出现的可能性越大。
e. Ψ修饰在mRNA不同区域的频率分布。
f–h. 采用KEGG（f）、GO（g）和GSEA（h）分析，阐明Ψ修饰mRNA相关的生物学功能和信号通路。
i–m. qRT-PCR分析第3组PH患者（n=10）肺组织中假尿苷酸合酶的表达。

PUS7在PH患者和模型中上调，并富集于肺动脉内皮细胞

在明确全局Ψ修饰失调后，研究者进一步验证PUS7的表达定位。Western blotting显示，PUS7在缺氧联合SU5416（SuHx）PH小鼠/大鼠模型以及第1组和第3组PH患者肺组织中均上调（Fig.2A–2C）。免疫组化和免疫荧光证实PUS7明显上调，且主要定位于肺血管内膜（Fig.2D–2F）。这一空间分布非常重要，因为肺血管内膜正是内皮细胞所在区域，提示PUS7可能在内皮功能障碍中扮演关键角色。第3组PH患者肺组织单细胞RNA测序显示，PUS7在内皮细胞中特异且显著上调（Fig.2G、2H），与公共数据库（GSE210248、GSE169477、GSE169471）中肺动脉高压患者的表达模式一致，说明PUS7在不同PH亚组PAEC中均上调。这种跨亚组的一致性提示PUS7可能是一个共同的病理节点，而不仅仅是第3组PH的特有现象。

原代细胞中，缺氧可显著上调PAEC和肺动脉外膜成纤维细胞（PAAF）中的PUS7，而PASMC中不明显（Fig.2I–2K）。免疫染色显示缺氧PAEC的核和质PUS7均增加（Fig.2L）。ELISA还发现第3组PH患者血清PUS7水平显著升高，提示其可能作为微创诊断指标。从转化医学角度看，血清PUS7的升高为PH的无创诊断提供了潜在生物标志物，但还需更大样本验证其敏感性和特异性。

图2：PUS7在PH动物模型和患者的肺组织及肺动脉中上调

a–c. 代表性Western blot显示假尿苷酸合酶7（PUS7）在SU5416/缺氧（SuHx）诱导的啮齿类肺高压（PH）模型（a，n=4只雄性小鼠；b，n=6只雄性大鼠）和PH患者（c，n=6例患者）肺组织中的表达。
d. 免疫组化显示PUS7在健康供体和PH患者肺组织中的表达。
e和f. 代表性共聚焦图像显示PH患者（e）或SuHx处理大鼠（f）肺切片免疫组化染色。细胞核用DAPI（蓝色）染色。
g. 点图展示通过Find All Markers功能鉴定的细胞簇中标记基因的表达。
h. UMAP可视化展示第3组PH和对照组（CON）的细胞聚类及PUS7基因表达分布。
i–k. 代表性Western blot及定量分析缺氧肺动脉平滑肌细胞（PASMC；i）、肺动脉内皮细胞（PAEC；j）和肺动脉外膜成纤维细胞（PAAF；k）中PUS7和β-actin的表达（n=6生物学重复）。
l. 代表性共聚焦图像显示缺氧PAEC中PUS7（绿色）的免疫组化染色。细胞核用DAPI（蓝色）染色。

基因敲除小鼠验证PUS7缺失改善PH

接下来，为了验证PUS7的致病功能，研究采用PUS7杂合子（PUS7+/−）和野生型小鼠评估PUS7在SuHx诱导PH中的作用（Fig.3A）。由于PUS7纯合敲除致死，杂合子模型成为研究其体内功能的重要工具。Western blotting确认敲除效率（Fig.3B）。PUS7缺失不影响正常及SuHx/博来霉素处理下小鼠体重（Fig.3C），说明PUS7缺失未引起明显全身毒性。SuHx或博来霉素处理显著损害肺动脉速度-时间积分、三尖瓣环收缩期位移、肺动脉加速时间/射血时间比，并升高右心室收缩压和右心室/左心室+室间隔重量比；这些效应在PUS7+/−小鼠中明显改善（Fig.3D–3I）。PUS7缺失小鼠还表现为血管中膜和右心室壁更薄、α-SMA表达更低、肌化肺动脉更少（Fig.3J–3O）。这些结果从遗传学角度证明PUS7是PH血管重塑的重要驱动因子。此外，PUS7过表达在常氧下即可引起轻度肺高压病理，在PH模型中进一步加重，说明PUS7表达水平与疾病严重程度相关。这提示PUS7不仅是“允许”因素，更可能是“驱动”因素。

图3：PUS7缺失改善SuHx诱导的小鼠PH

a. 慢性缺氧联合SU5416（SuHx）诱导肺高压（PH）模型的动物处理方案示意图。假尿苷酸合酶7（PUS7）+/+（野生型[WT]）和PUS7+/−小鼠置于缺氧环境21天，并在第1、7、14天注射SU5416（20 mg/kg）。
b. 代表性Western blot及定量分析WT和PUS7+/−小鼠肺组织中PUS7和β-actin的表达。
c. 组间分析显示PUS7敲低对小鼠体重无显著影响。
d–g. 代表性超声心动图图像（d）及组间数据，显示PUS7+/−减轻SuHx处理小鼠肺动脉速度-时间积分（PAVTI；e）、三尖瓣环收缩期位移（TAPSE；f）和肺动脉加速时间/射血时间比（PAT/PET；g）的下降。
h和i. 代表性血流动力学描记图及组间分析，显示PUS7+/−对SuHx小鼠模型右心室（RV）收缩压（RVSP）的影响。
j–o. 苏木精-伊红（H&E）和免疫荧光染色显示，PUS7敲低显著改善SuHx诱导的小鼠中膜增厚（j和k）、右心室壁增厚（l和m）及血管肌化（n和o）。

内皮特异性敲低：AAV-ECKD缓解PH

为明确内皮PUS7的作用，研究使用Tie1启动子驱动的AAV实现内皮细胞特异性PUS7敲低（AAV-ECKD；Fig.4A）。超声显示，AAV-ECKD显著减轻缺氧或博来霉素诱导的肺动脉速度-时间积分、肺动脉加速时间/射血时间比和三尖瓣环收缩期位移损害（Fig.4B–4D），并降低右心室收缩压和右心室/左心室+室间隔重量比（Fig.4E–4G）。形态学分析显示，AAV-ECKD明显减轻缺氧或博来霉素诱导的肺动脉肌化和血管中膜增厚（Fig.4H、4I）。这些结果证明，内皮特异性沉默PUS7可在体内显著减轻PH进展。从讨论角度看，内皮细胞特异性干预的有效性，进一步支持PAEC是PUS7致病作用的主要靶细胞，也为未来开发内皮靶向递送系统提供了依据。

图4：内皮细胞特异性沉默PUS7减轻缺氧或博来霉素诱导的小鼠PH

a. 方案示意图。小鼠接受单次尾静脉注射Tie1启动子驱动的腺相关病毒载体LungX，用于内皮细胞特异性敲低假尿苷酸合酶7（PUS7）（AAV-ECKD）或AAV阴性对照（NC），置于常氧（NOR）条件14天，随后进行缺氧（HYP）处理28天，或经气管内给予博来霉素（BLM）并在常氧下维持21天。
b–d. 组间分析显示，缺氧或BLM诱导的肺高压（PH）小鼠模型中肺动脉速度-时间积分（PAVTI；b）、肺动脉加速时间/射血时间比（PAT/PET；c）和三尖瓣环收缩期位移（TAPSE；d）下降，而这些参数在AAV-ECKD小鼠中改善。
e–g. 代表性血流动力学描记图及组间分析，显示内皮特异性PUS7沉默对缺氧或BLM处理PH小鼠模型右心室收缩压（RVSP；e；f，统计分析）和右心室/左心室+室间隔重量比[RV/(LV+S)；g]的影响。
h和i. 免疫荧光染色和苏木精-伊红（H&E）染色显示，PUS7敲低显著改善缺氧或BLM诱导的血管肌化增加（h）和中膜增厚（直径25–75 μm；i）。

PUS7调控PAEC/PAAF病理功能障碍

随后，在细胞层面，研究评估PUS7对PAEC和PAAF功能障碍的影响。在PAEC中，研究设计PUS7 siRNA并经qPCR和Western blotting验证（Fig.5A）。EdU、Western blotting和CCK8实验显示，SI-PUS7显著减轻缺氧诱导的过度增殖（Fig.5B–5G）。流式细胞术显示SI-PUS7阻止G1向S期转换（Fig.5H），并增加缺氧PAEC凋亡（Fig.5I）。Transwell和血管形成实验表明，SI-PUS7减轻缺氧诱导的过度迁移和血管生成能力增强（Fig.5J–5M）。PUS7还明显改变细胞骨架结构：缺氧人PAEC中应力纤维紊乱，paxillin分布不清；SI-PUS7可逆转这些异常，恢复应力纤维和黏着斑定位（Fig.5N、5O）。PAAF中也有类似效应，PUS7沉默可抑制缺氧诱导的过度增殖。持续PUS7过表达在常氧下即可触发PAEC功能障碍。这些结果说明，PAEC中的PUS7在低氧诱导PH中发挥关键作用。从机制讨论看，PUS7可能通过调控细胞周期和凋亡相关基因的Ψ修饰，改变内皮细胞的稳态，使其从静止状态转向增殖和迁移状态，这是血管重塑的早期细胞学基础。

图 5：PUS7缺失减轻缺氧诱导的PAEC功能障碍

a. qRT-PCR分析PUS7 siRNA在PAEC中的敲低效率（n=3生物学重复）。
b–c. 代表性EdU染色及组间数据，显示抑制PUS7减少缺氧诱导的PAEC增殖。
d–g. 代表性Western blot及组间数据，显示缺氧下PUS7沉默后PAEC中PUS7、cyclin A和CDK1表达。
h–i. 流式细胞术显示抑制PUS7对缺氧PAEC细胞周期（h）和凋亡（i）的影响。
j–k. Transwell分析显示PUS7沉默后缺氧PAEC的迁移能力。
l–m. 血管形成实验显示PUS7敲低后缺氧PAEC的血管生成能力。
n–o. 共聚焦显微镜显示PUS7敲低对PAEC细胞骨架结构的影响，细胞用phalloidin（n）或paxillin（o）染色。

TGFBI是PUS7关键下游靶点，位点688 Ψ维持mRNA稳定性

为了锁定PUS7下游靶点，研究对PUS7敲低PAEC进行RNA高通量转录组测序（Fig.6A、6B）。由于Ψ修饰增强RNA稳定性，研究者将PUS7敲低后下调基因与BID-seq中仅在PH患者存在Ψ修饰的基因取交集，鉴定出24个重叠基因（Fig.6C）。这种多组学交集策略有效缩小了候选范围，也体现了BID-seq在靶点发现中的价值。经富集分析，选择TGFBI、IL6ST、BCL2L12和TACC1验证。qPCR显示PUS7敲低显著降低TGFBI、BCL2L12和TACC1，其中TGFBI下降最明显（Fig.6D）。免疫组化、免疫荧光和Western blotting证实TGFBI在PH患者肺组织（Fig.6E–6G）和SuHx小鼠（Fig.6H）中上调。PUS7敲低可调节PAEC中TGFBI表达（Fig.6I）。FISH显示PUS7与TGFBI mRNA明显共定位（Fig.6J）。RIP和RIP-seq证明PUS7直接结合TGFBI mRNA（Fig.6K）。Actinomycin D实验显示PUS7过表达减少TGFBI mRNA降解（Fig.6L）。这些结果从结合、定位到稳定性多个层面证明PUS7直接调控TGFBI。

进一步，通过BID-seq缺失率分析，研究者发现TGFBI潜在Ψ修饰高分位点：628、688、844和847（Fig.6M）。CCK8显示TGFBI过表达48小时可拯救PUS7敲低导致的细胞活力下降，但携带688位点突变的TGFBI mRNA则失去该效应（Fig.6N）。Actinomycin D追踪显示U688C突变显著缩短TGFBI mRNA半衰期，假尿苷化缺陷突变体降解加速，半衰期较WT缩短约40%–50%。这表明688位点Ψ修饰对维持TGFBI mRNA稳定性必不可少。研究还发现PUS7可影响TGFBI前体mRNA剪接：SI-PUS7使E010、E011、E023、E027和E031等外显子表达降低（Fig.6O），并显著改变TGFBI选择性3′剪接位点和内含子保留事件（Fig.6P、6Q）。因此，PUS7可能通过Ψ修饰增强TGFBI前体mRNA剪接效率，加速其成熟为功能性mRNA。从讨论角度看，TGFBI作为一种基质细胞蛋白，参与细胞黏附和细胞外基质相互作用，其上调可能直接促进内皮-间充质转化和血管壁纤维化，这与PH中观察到的血管重塑高度吻合。此外，位点特异性Ψ修饰的发现，为开发靶向该位点的精准干预策略提供了可能。

图6：PUS7通过Ψ修饰TGFBI mRNA调控PAEC功能

a和b. 热图（a）和火山图（b）展示假尿苷酸合酶7（PUS7）缺失导致肺动脉内皮细胞（PAEC）中差异基因表达。

c. 韦恩图显示亚硫酸氢盐诱导缺失测序（BID-seq）与RNA高通量转录组测序（RNA-seq）之间的排名靠前重叠基因。

d. qRT-PCR分析显示PUS7敲低后PAEC中候选基因表达。

e和f. 免疫组化（e）和免疫组化染色（f）显示，与健康供体相比，转化生长因子-β诱导蛋白（TGFBI）在肺高压（PH）患者肺动脉内膜中高表达。

g和h. Western blotting分析显示TGFBI在PH患者肺组织（g）和缺氧（HYP）联合SU5416（SuHx）PH小鼠模型（h）中的表达。

i. 代表性Western blot及组间结果展示缺氧条件下PUS7敲低后PAEC中TGFBI的表达。

j. 代表性共聚焦图像显示缺氧PAEC中PUS7（绿色）和TGFBI mRNA荧光探针（红色）的荧光原位杂交染色。细胞核用Hoechst（蓝色）染色。

k. RNA免疫沉淀实验显示PUS7可直接结合TGFBI mRNA。

l. Actinomycin D实验显示PUS7过表达（OE）稳定TGFBI mRNA水平。

m. 图示BID-seq检测到的TGFBI mRNA中假尿苷（Ψ）修饰位点。

n. CCK8分析显示缺氧条件下，PUS7 siRNA与携带Ψ修饰位点突变型或野生型TGFBI mRNA的表达质粒共转染后PAEC的细胞活力。

o. 通过DEXSeq包分析的RNA高通量转录组测序（RNA-seq）数据中外显子使用的差异；x轴显示外显子位置，y轴显示两组外显子表达。右上角为组别颜色编码。x轴上的紫红色表示组间外显子使用存在显著差异。

p和q. Sashimi图展示对照组（CON；阴性对照[NC]；橙色）和PUS7沉默（PUS7 siRNA [SI]；红色）样本中TGFBI的选择性3′剪接位点（A3SS；p）和保留内含子（RI；q）事件。

机制：HIF-2α/PUS7/TGFBI/PI3K-AKT正反馈环与内皮-平滑肌旁分泌

在机制上，研究进一步解析PUS7下游信号网络。TGFBI沉默可消除PUS7过表达诱导的PAEC增殖加速、细胞周期进展和凋亡减少（Fig.7A–7C）。Transwell和血管形成实验证实，沉默TGFBI可逆转PUS7过表达诱导的迁移和血管生成（Fig.7D、7E）。Western blotting显示，PUS7过表达显著上调磷酸化AKT和HIF-2α，而沉默TGFBI可阻断这一效应（Fig.7F、7G）。PAAF中PUS7沉默同样减弱缺氧诱导的TGFBI上调和AKT磷酸化。值得注意的是，HIF-2α敲低可消除缺氧诱导的PUS7上调，提示HIF-2α与PUS7互相调控（Fig.7H、7I）。生信分析显示HIF-2α可结合PUS7启动子（Fig.7J）；双荧光素酶报告实验显示，共转染HIF-2α和WT PUS7启动子质粒显著增加荧光素酶活性，而预测结合位点突变则消除该效应（Fig.7K）。ChIP实验进一步证实HIF-2α特异性结合PUS7启动子P1区域（Fig.7L）。

因此，研究提出以下机制模型：

1. 低氧诱导HIF-2α上调，HIF-2α结合PUS7启动子促进PUS7表达；

2. PUS7催化TGFBI mRNA位点特异性Ψ修饰，增强其稳定性与剪接成熟；

3. TGFBI上调激活PI3K-AKT信号，促进PAEC增殖、迁移和血管生成；

4. PI3K-AKT-mTORC2稳定HIF-2α，形成HIF-2α/PUS7/TGFBI/PI3K-AKT正反馈环，持续放大血管重塑；

5. 重组蛋白和条件培养基实验证明，TGFBI作为主要旁分泌介质，由内皮PUS7驱动，激活邻近PASMC的AKT信号，促进平滑肌增殖和血管重塑。

从讨论角度看，这一正反馈环的发现具有重要理论意义。它解释了为什么PH一旦启动，即使初始低氧刺激解除，血管重塑仍可持续进展。这种“记忆”效应可能与表观修饰的稳定性有关，因为Ψ修饰本身是相对稳定的化学修饰，不易被逆转。此外，内皮-平滑肌旁分泌轴的揭示，将PAEC功能障碍与PASMC增殖直接联系起来，完善了PH血管重塑的细胞间通讯网络。未来或可针对该环路的多个节点进行联合干预，以提高治疗效果。

图7：HIF-2α/PUS7/TGFBI/PI3K-AKT信号轴进行性加重肺高压

a–e. 沉默SI-TGFBI（TGFBI siRNA）消除了假尿苷酸合酶7（PUS7）过表达（OE）在肺动脉内皮细胞（PAEC）中的作用。a. EdU实验：细胞增殖；b和c. 流式细胞术分析：细胞周期（b）和凋亡（c）；d. Transwell实验：迁移能力；e. 血管形成实验：血管生成能力。

f–i. 代表性Western blot及定量分析，显示沉默SI-TGFBI对磷酸化AKT（p-AKT；f）和缺氧诱导因子-2α（HIF-2α；g）表达的影响，以及SI-HIF-2α（h）对常氧（NOR）或缺氧（HYP）条件下PAEC中PUS7（i）的影响。

j. hTFtarget分析显示HIF-2α与PUS7启动子区域的结合基序。

k. 根据HIF-2α与PUS7启动子的结合位点设计双荧光素酶载体和突变质粒。双荧光素酶实验用于验证293T细胞中HIF-2α与PUS7启动子的相互作用。

l. 染色质免疫沉淀-定量实时PCR分析显示，在抗HIF-2α免疫沉淀组分中检测到PUS7启动子区域。

转化：PUS7抑制剂NSC107512改善动物PH

在治疗转化方面，研究评估了PUS7小分子抑制剂NSC107512。结构分析显示其可结合PUS7催化域（Fig.8A）。细胞实验中，NSC107512浓度依赖性地抑制PAEC增殖和细胞周期进展，并减弱缺氧诱导的TGFBI上调（Fig.8B–8D）。在SuHx及博来霉素诱导的PH大鼠模型中，NSC107512表现出剂量依赖性疗效和较低系统毒性，可改善超声与血流动力学指标，减轻血管重塑和右心室肥厚，并在体内逆转TGFBI和磷酸化AKT上调（Fig.8F–8O）。这些结果提示，NSC107512是治疗PH的潜在新药。与主要针对血管舒张的传统疗法不同，NSC107512通过抑制PUS7从源头干预血管重塑；但后续仍需药代动力学、长期毒性和大动物实验验证其临床转化潜力。

图8：NSC107512对动物模型PH的影响

a. 利用PyMOL和Discovery Studio绘制NSC107512与假尿苷酸合酶7（PUS7）蛋白相互作用中的结合结构域和特定氨基酸。

b. 代表性Western blot及组间数据，显示抑制PUS7减轻缺氧（HYP）诱导的肺动脉内皮细胞（PAEC）中转化生长因子β诱导蛋白（TGFBI）表达升高。

c. EdU分析显示NSC107512抑制PUS7减少缺氧诱导的PAEC增殖。

d. 流式细胞术分析显示NSC107512对缺氧PAEC细胞周期的影响。

e. 缺氧联合SU5416（SuHx）诱导肺高压（PH）大鼠模型的动物处理方案示意图。

f. NSC107512治疗的SuHx诱导PH大鼠体重。

g–i. 组间分析显示NSC107512抑制PUS7显著减轻SuHx大鼠肺动脉速度-时间积分（PAVTI；g）、肺动脉加速时间/射血时间比（PAT/PET；h）和三尖瓣环收缩期位移（TAPSE；i）的下降。

j. 代表性血流动力学描记图及组间分析，显示NSC107512抑制PUS7对SuHx大鼠模型右心室收缩压（RVSP）的治疗效果。

k–n. 免疫荧光和苏木精-伊红（H&E）染色显示，NSC107512抑制PUS7显著改善SuHx诱导的血管肌化和新内膜形成增加（k）、中膜增厚（l）及右心室壁增厚（m和n）。

o. 代表性Western blot及组间数据，显示抑制PUS7减轻SuHx诱导的PH大鼠模型肺组织中TGFBI表达升高。

产品1：单碱基假尿嘧啶修饰测序(BID-Seq)

云序生物针对RNA假尿嘧啶修饰采取的是亚硫酸氢盐（BS）诱导的缺失测序法(BID-seq)，可同时对Ψ修饰进行高通量检测和单碱基定位。BID-seq技术可以在不影响胞苷的情况下，将定量地转化为“Ψ-BS加合物”，导致逆转录后在Ψ位点处出现碱基缺失信号。建库测序后再根据检测标准进行数据处理和分析，来实现单碱基分辨率下对RNA上Ψ修饰的定量测序，BID-seq技术将有助于研究RNA上修饰在诸多生理或病理过程中的位点分布、修饰化程度动态变化、生物学功能等。

产品2：单细胞转录组测序技术（scRNA-seq）

单细胞转录组测序技术(scRNA-seq)是指在单个细胞水平上，对转录组进行高通量测序分析的一项新技术，它能够弥补传统高通量测序的局限性，揭示单个细胞的转录组信息，从细胞水平上提供基因差异信息，比较各类细胞转录组之间的差异反映细胞间的异质性。云序生物的单细胞转录组测序服务基本流程包括单细胞分离、mRNA提取与逆转录、cDNA扩增、文库构建、然后测序。与Bulk RNA-seq的基本流程相似，主要区别就在于单细胞分离获取。云序生物单细胞测序建库系统基于液滴微流控技术，采用突破性的微球分子标签技术，携带千万级别的分子标签，能够快速高效地构建高质量的单细胞测序文库。

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