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  • Dual RNA-Seq技术

     

    技术简介

     

    Dual RNA-Seq 互作转录组测序是一种新兴技术,用于分析细菌病原体感染哺乳动物细胞的基因表达变化。与传统方法不同,可同时检测宿主(如人类、动植物)和病原体(如病毒、细菌、真菌、寄生虫等)在共同微环境中的基因表达谱,从而系统解析宿主与病原体之间的动态互作关系。Dual RNA-Seq 主要特征在于构建一个文库可同时研究两个及其以上物种,并将测序数据分别比对到宿主基因组和病原体基因组,可实现同时对宿主和病原体的测序和分析。该技术突破了传统转录组学仅单一分析宿主或病原体的局限,并实现在细菌感染模型中的各种新兴应用,包括细菌基因活性与特定宿主反应的直接关联,以及鉴定在标准毒力测定中不可见的病原体基因的“分子表型”。

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    DualRNA-seq与传统RNA-seq流程图

     

    云序生物Dual RNA-Seq 的技术原理是从包含宿主与病原体的同一样本(如感染组织、细胞共培养体系)中提取总 RNA,去除核糖体 RNA(rRNA)后进行高通量测序;将获得的测序数据分别比对至宿主基因组和病原体基因组,分离并定量双方的转录本,识别差异表达基因,结合 GO、KEGG 通路富集及共表达网络分析等方法,挖掘宿主与病原体互作过程中的关键基因、信号通路及调控机制,也可以通过比较基因组学来研究病原体野生型和突变型的差异。

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    Dual RNA-seq实验及数据分析流程

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  • 案例展示

     

    HECTD3 在细菌感染期间介导 TRAF3 多泛素化和 I 型干扰素诱导

     

    原文:HECTD3 mediates TRAF3 polyubiquitination and type I interferon induction during bacterial infection

     

    期刊:J Clin Invest         影响因子 19.5

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    TRAF3 的赖氨酸 63 连接 (K63 连接) 多泛素化协调模式识别受体与诱导 I 型 IFN 的通路中募集的接头蛋白和下游激活剂 TBK1 的结合。自身泛素化或其他 E3 连接酶是否介导 K63 连接的 TRAF3 多泛素化仍不清楚。我们通过RNA-seq(Dual RNA-seq)证明,缺乏 E3 连接酶基因 Hectd3 的小鼠通过限制细菌传播,显着提高了宿主对细胞内细菌 Francisella novicida、分枝杆菌和李斯特菌感染的防御能力。在没有 HECTD3 的情况下,I 型 IFN 反应在体内和体外细菌感染期间都受损。HECTD3 通过介导 TRAF3 在残基 K138 处的 K63 连接多泛素化来调节 I 型 IFN 的产生。HECTD3 的催化结构域调节 TRAF3 K63 多泛素化,从而使 TRAF3-TBK1 复合物形成。我们的研究提供了对 TRAF3 调节机制的见解,并提供了针对细胞内细菌感染和炎症性疾病的潜在治疗靶点。

  • 云序优势

     

    全面高效:

    单样本高通量全面检测互作物种转录本,揭示基因表达及动态变化。

     

    一站式服务:

    客户只需提供组织、细胞或RNA,云序生物为您完成Dual RNA-seq全套实验服务。

     

    专业的生物信息学分析:

    云序生物拥有专业的生物信息分析团队,助力客户个性化挖掘实验数据。

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