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  • 外泌体RNA测序技术

     

     

    外泌体RNA测序产品列表:

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    技术简介:

     

    外泌体(Exosomes)是由细胞主动分泌的纳米级(40–100nm)胞外囊泡,广泛存在于血液、唾液、尿液等体液中。其独特的脂质双分子层膜结构不仅保护内容物免遭酶解,还可通过表面蛋白靶向递送至受体细胞,在细胞间通讯中扮演重要角色。

    外泌体携带的分子组分复杂多样,除蛋白质外,还富含多种功能性RNA分子,包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)、信使RNA(mRNA)和环状RNA(circRNA)。这些RNA分子统称为外泌体RNA(exRNA),具有完整序列结构和生物活性。相较于游离RNA,外泌体内部RNA因膜结构保护而浓度更高、稳定性更强,成为理想的液体活检标志物来源。

    近年研究发现,外泌体RNA在肿瘤发生发展中具有关键调控作用:

    ·  miRNA(如miR-21、miR-155)通过抑制抑癌基因表达促进肿瘤增殖与转移;

    ·   lncRNA(如HOTAIR)可重塑肿瘤微环境,增强免疫逃逸;

    ·  circRNA通过“分子海绵”效应调控致癌信号通路。

    基于外泌体RNA的稳定性与特异性,其在肿瘤早期诊断、疗效评估及靶向治疗开发中展现出巨大潜力。

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    外泌体:具有多效性功能的细胞间转运系统

     

     

    技术简介

    为帮助客户对肿瘤外泌体RNA进行相关研究,揭示外泌体RNA在肿瘤发生发展中的分子机制,云序生物正式推出外泌体RNA测序服务,助力推进肿瘤的诊断和治疗手段。

     

     

     

    技术路线:

    1. 云序生物采用超速离心法或成熟的商业试剂盒提取外泌体,并对提取的外泌体进行电镜成像、WB检测及NTA粒径检测;
    2. 提取外泌体RNA,针对性处理不同种类RNA,最大程度保留目标RNA信息;
    3. 高通量测序及生信分析。

     

     

     

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  • 案例分析

     

    案例1:脂肪组织巨噬细胞分泌外泌体 miRNA可大幅改善体内胰岛素敏感性

     

    原文:Adipose Tissue Macrophage-Derived Exosomal miRNAs Can Modulate In Vivo and In Vitro Insulin Sensitivity

             

    外泌体中包含多种miRNA,调控靶细胞生理活性。近日,Cell(IF:30.410)发表文章,发现脂肪组织巨噬细胞(adipose tissue macrophages,ATMs)分泌的外泌体中含有miRNA并可以转移到胰岛素的靶细胞中,从而调节靶细胞对胰岛素的敏感性以及体内的总糖代谢稳态。Olefsky团队从肥胖小鼠脂肪组织内分离出巨噬细胞,再收集细胞里的外泌体,用它们处理体型瘦的健康小鼠,发现接受了外源外泌体的小鼠虽然体重依然正常,但却出现肥胖诱导型胰岛素抵抗症状。相反,提取瘦小鼠来源的脂肪组织巨噬细胞外泌体,并用它在肥胖小鼠上治疗,会大幅改善体内和体外的葡萄糖耐受和胰岛素敏感性。最后,研究人员证明miR-155是肥胖个体脂肪组织巨噬细胞外泌体差异表达的miRNA之一,miR-155极有可能直接通过抑制其靶基因PPARγ来抑制胰岛素信号传导和葡萄糖耐受。

     

     

     

     

    案例2:外泌体LncRNA促进肿瘤细胞耐药性

     

    原文:Exosome-Transmitted lncARSR Promotes Sunitinib Resistance in Renal Cancer by Acting as a Competing Endogenous RNA

             

    肿瘤学顶级期刊Cancer Cell(影响因子:27.407)发表文章,阐述了疾病相关LncRNA参与肾癌耐药性及通过外泌体传播的生理机制,将外泌体LncRNA的研究又一次带到了大众视野中。首先作者通过高通量手段检测了野生型细胞和耐药型细胞中差异表达的LncRNA,并通过病人源性异种移植模型(PDX)鉴定到8条疑似致病LncRNA。将其中一条LncRNA-LncARSR (Activated in RCC with Sunitinib Resistance)敲除后,细胞耐药性显著增强。进一步研究表明LncARSR与肾癌细胞增殖、粘附等表型密切相关。作者研究发现,LncARSR主要存在于细胞外泌体中,并且耐药细胞外泌体LncRNA含量要远高于野生型细胞。作者随后通过RNA Pull Down实验证实核不均一性核糖核蛋白A2B1(hnRNPA2B1)负责包埋LncARSR进入外泌体。当提取耐药细胞外泌体孵育到野生型细胞后,野生型细胞胞内LncARSR含量增加,细胞耐药性增强。而胞内LncARSR主要发挥miRNA海绵功能,通过竞争性结合miRNA-34和miRNA-449,促进AXL和c-MET表达及下游STAT3、AKT、ERK信号通路的活化,最终导致舒尼替尼耐药性形成。

     

     

     

    案例3:Diabetes脂肪来源的干细胞分泌外泌体可减轻脂肪炎症和肥胖现象

     

    原文:Exosomes From Adipose-Derived Stem Cells Attenuate Adipose Inflammation and Obesity Through Polarizing M2 Macrophages and Beiging in White Adipose Tissue

             

    在这项研究中,来自山东大学基础医学院的研究人员利用mRNA测序等技术,研究发现来自WAT的ADSCs分泌外泌体使巨噬细胞向表达高水平的Arg-1和IL-10的M2极化,该过程主要依赖外泌体转移活性STAT3来实现的。值得注意的是,ADSC衍生的外泌体处理的肥胖小鼠后表现出WAT炎症的减少,改善的代谢稳态和延缓肥胖进展。ADSC衍生的外泌体在WAT中驱动M2巨噬细胞的极化,进一步促进了WAT的作用,从而产生了上述有益的效果。本文阐述了一种全新的外泌体介导的ADSCs巨噬细胞级联干扰机制,促进 WAT 通路免疫反应及代谢稳态,从而为肥胖和糖尿病患者提供潜在的治疗方案。

    ADSC衍生的外泌体可改善高脂饮食喂养小鼠的WAT动态平衡

     

  • 云序技术优势:

     

    一、提供一站式服务

    客户只需提供细胞上清、血清血浆等体液,组织或外泌体RNA,云序生物为您完成从外泌体提取、外泌体鉴定、外泌体转录组测序、生信分析功能验证整套服务流程。

    二、商业化试剂盒抽提外泌体

    云序生物使用成熟的商业化试剂盒抽提外泌体,极大改善样品的均一性。客户可选择从外泌体到RNA测序一步流程法,也可选择先提取外泌体,再由外泌体抽取RNA两步流程法。

     

    三、丰富的外泌体测序经验

    云序生物作为以高通量测序技术为依托的科研服务公司,拥有丰富的微量样本测序经验,为众多临床与基础科研研究者提供了高质量的科研服务,助力客户发表过31篇外泌体的SCI文章,累积影响因子高达192+。

     

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    四、专业的生物信息学分析

    云序生物具有强大的生物信息学团队,能够满足客户对数据各类深入的分析要求。

     

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