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O8G DNA修饰测序技术
技术简介
8-氧化鸟嘌呤(8-oxoG)是哺乳动物细胞内活性氧攻击DNA中的鸟嘌呤从而产生的一种DNA修饰,它可以与腺嘌呤配对并诱导鸟嘌呤-胸腺嘧啶(G> T)突变,是病理生理学中一种通过活性氧氧化导致疾病表型的修饰。8-氧化鸟嘌呤(8-oxo)在DNA上的修饰是一种重要的氧化损伤标志,成为氧化应激相关疾病(如癌症、神经退行性疾病、衰老)的关键病理标志物。
O8G 诱导的诱变及其DNA修复途径
云序生物基于DIP-seq(DNA免疫沉淀测序)的O8G DNA修饰测序(O8G DIP-seq)服务,通过高特异性抗体捕获8-oxoG修饰的DNA片段,将高通量数据比对到参考基因组,识别全基因组上的修饰区域,获得全基因组修饰区域的修饰信息和注释信息。同时,对分组样品进行差异修饰区的修饰位点分析,在全基因组水平上提取各组样品的差异修饰位点和注释信息。之后,根据差异修饰结果,进一步通过GO/KEGG富集挖掘其关联的生物学过程(如氧化应激、DNA修复)及疾病通路;也可以个性化整合ATAC-seq、RNA-seq等多组学数据揭示8-oxoG对染色质开放性与基因表达的影响,从而为客户对氧化损伤的分子机制研究与干预策略开发提供数据支撑。
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案例展示
DNA 中 8-氧代鸟嘌呤的动力学:碱基配对和核苷酸背景的决定性作用
原文:HECTD3 mediates TRAF3 polyubiquitination and type I interferon induction during bacterial infection
期刊:Journal of the American Chemical Society 影响因子 14.4 发表时间:2023/3
8-Oxo-7,8-二氢鸟嘌呤 (oxoG) 是一种丰富的 DNA 损伤,可与腺嘌呤错配并诱发突变。为防止这种情况,细胞拥有 DNA 修复糖基化酶,可从 oxoG:C 对(细菌 Fpg、人 OGG1)中切除 oxoG,或从 oxoG:A 错配(细菌 MutY、人 MUTYH)中切除 A。早期病变识别步骤仍然模糊不清,可能包括强制打开碱基对或捕获自发打开的碱基对。我们检测 DNA 亚氨基质子交换,并分析了 oxoG:C、oxoG:A 及其在具有不同堆积能量的核苷酸环境中未受损的对应物的动力学。即使在堆叠不佳的情况下,oxoG:C 对也不会比 G:C 更容易打开,这与 Fpg/OGG1 的螺旋外碱基捕获相矛盾。相反,与 A 相对的 oxoG 显着填充了螺旋外状态。
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云序优势
一站式服务: 客户只需提供相关样品的基因组DNA,云序生物为您完成从O8G-IP富集,文库制备,上机测序到数据分析整套服务流程。
优化的实验流程: O8G-IP的富集效率是决定数据质量的关键,云序生物O8G-IP实验采用预验证的商业化抗体和精心优化的实验流程,具有极高的效率和特异性。
严格的质控: 实验的各个关键步骤进行严格的质控,全程监控实验质量,确保客户得到优质的数据。
专业的生物信息学分析: 云序生物拥有专业的生物信息分析团队,帮助客户进行实验数据的全面挖掘。
数据分析
1、DNA O8G富集峰的识别
通过高通量测序和生物信息分析,识别修饰区富集的基因组区域,默认p <= 1e-5(具体参数以报告为准,云序生物会根据数据,适当调整参数)的峰为统计上明显的富集峰。
注::每个样品组做一个Input,以去除基因组背景,降低假阳性率
2、DNA修饰区(富集峰)的注释 富集峰识别后,得到的是一堆基因组位置信息,通过生物信息分析利用邻近基因对富集峰进行注释,并根据峰中点相对于已知基因的位置,将富集峰为启动子峰、上游峰、内含子峰、外显子峰、基因间峰。
3、差异修饰区(富集峰)的鉴定与注释
4、差异修饰区的GO与信号通路分析
5、DNA O8G富集峰区域的在基因中的分布
6、Motif 分析
7、韦恩图
技术服务
Technical Service
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RNA修饰组测序
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关于我们
云序生物聚焦科研前沿领域,是国内率先开展RNA修饰,转录组及eccDNA研究的创新性企业,提供各类RNA修饰,各类RNA分子,各类测序技术及eccDNA系统性解决方案,参与的研究成果在各大国际顶级期刊发表数百篇,影响因子累积10000+。