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蛋白组学
TMT蛋白质谱

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技术简介

TMT™(Tandem Mass Tag™)技术:是由美国Thermo Scientific公司研发的一种多肽体外标记技术。该技术采用2种、6种或10种同位素的标签,通过特异性标记多肽的氨基基团,然后进行串联质谱分析,可同时比较2组、6组、10组或11组不同样品中蛋白质的相对含量。TMT™标签由三部分组成:分子量报告子、分子量标准化部分和反应基团,形成2种、6种或10种或11种相对分子质量均等量的异位标签。

技术优势
可同时对2-10种不同条件样品进行蛋白质差异分析;
适合广泛样品类型:胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白、分泌蛋白等;
可检测低丰度蛋白质,强酸(碱)性蛋白质、10KD或100KD的蛋白质分子。

实验流程

云序优势

检测通量高:

一次性的对样品中的全部蛋白进行相对定量分析。

结果准确:

利用高分辨率的质谱法检测,相对二维电泳等传统方法而言更加准确,快捷。

无需标记:

克服标记样本的局限性,可研究大规模样本。

样品需求量少:

每run可检测多达20种蛋白。

性价比高:

无需使用昂贵的标记实际,实验性价比高。

样本要求

1)富含杂质或蛋白含量低的样本,如植物的根茎、木质部、韧皮部组织等:干重≥5g

2)植物类样本送样量同样适合于蕈类真菌,如蘑菇、木耳:湿重≥1g。

3)细胞样本如需进行磷酸化位点富集鉴定,细胞数目须达到:107,约细胞沉淀体积100µl。

4)由于解冻后血细胞易破裂,细胞内蛋白溶出来会影响分析结果,因此建议不要直接送全血样本。

5)血液类样本:如果直接送提取蛋白,需先去除高丰度蛋白。

6)尿液样本:送样前1000rpm离心5min,弃去沉淀。

7)如果是其他特殊样本,或对样本要求有疑问,请联系我们。

数据分析

数据产出统计

蛋白质鉴定结果

蛋白质定量结果

蛋白质GO分析

蛋白质COG分析

蛋白质Pathway代谢通路分析

差异蛋白GO富集分析

差异蛋白的Pathway富集分析

重复性分析(仅针对有重复设计的项目)

多样品间表达模式聚类(适用于样本数≥3的项目)


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