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MicroRNA-182调控Sirt1诱导的糖尿病角膜神经再生

发布于:2017-09-07 16:27:37 点击量:478

题目:microRNA-182 Mediates Sirt1-Induced Diabetic Corneal Nerve Regeneration

杂志:Diabetes        IF:8.684

摘要:糖尿病人常伴随糖尿病性角膜病的发生,主要是由神经损伤和角膜敏感性的降低引起。已有研究证明Sirt1在中枢神经系统中起到神经保护的作用,过表达Sirt1会促进角膜损伤修复的进程。然而,Sirt1的具体作用机制仍不清楚。本文主要针对Sirt1的作用机制进行研究,阐述了Sirt1/ miR-182在神经再生方面的作用。

技术路线

 

      1.高通量筛选第一步:miRNA表达谱

结膜下注射使小鼠过表达Sirt1,然后检测miRNA表达谱,发现miR-182表达显著上调。已有文献报道miR-182是感觉神经元特异性的miRNA且参与视网膜病的发生。因此作者认为miR-182是Sirt1的下游靶点,并对它进行接下来的研究。

      2.高通量筛选第二步:PCR芯片

在进一步的研究中,文章想要探究miR-182的靶基因。首先利用生物信息学软件预测发现:miR-182的很多靶基因都属于氧化应激和抗氧化压力通路相关基因。为了进一步得到这个信号通路中所有基因在糖尿病中的表达变化,文章用氧化应激和抗氧化PCR芯片检测相关基因的表达,发现NOX4在糖尿病小鼠中显著上调。暗示NOX4在糖尿病神经损伤方面发挥关键的调控作用。


 

3.必不可少的功能研究

在利用高通量技术筛选到Sirt1的靶基因miR-182后,功能实验证明miR-182能够促进神经细胞生长及损伤后的再生。当利用PCR芯片寻找到差异最明显的miR-182靶基因-NOX4后,功能实验也验证NOX4会抑制miR-182诱导的神经再生的进程。


小结:高通量检测不仅可以研究疾病发生中的关键分子,还可以如本文一样,在已知蛋白生物功能的基础上筛选其下游靶基因进行分子机制研究。本文在已知功能的基础上,通过miRNA高通量检测筛选出下游靶标miR-182, 然后利用PCR芯片快速筛选出miR-182靶基因-NOX4。文章思路清晰,环环相扣,对功能机制的研究非常具有借鉴意义。


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